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安捷倫HPLC維護
  • 發布日期:2018-06-05      瀏覽次數:273
    • 一、如何處理 HPLC 中的鹽帶來的問題?

      很多問題是由于流動相含有鹽成分造成的。建議在清洗時將水加熱后再沖洗,這樣既可以將鹽溶解的更好,也可以溶解一些脂溶性物質,會減少很多問題的發生,包括管路堵塞,鹽析出,基線噪音……

      二、安捷倫11001200液相泵的日常維護 
       

      泵是液相色譜的核心,泵將流動相從溶劑瓶輸送到液相流路系統中,并要在高壓下保持流量和壓力的穩定。泵的狀態正常是液相色譜準確分析的基礎,所以平日一定要重視對泵的維護。下面就安捷倫1100/1200液相色譜泵的日常維護進行簡要的介紹。

      1.流動相的準備
      為了防止顆粒性物質對泵組件的磨損,流動相(特別是水相)應該新鮮配置并且過濾。上機前對流動相進行適當的超聲脫氣,以保證更好的在線脫氣和在線混合的效果。

      2.比例閥溶劑通道的分配
      四元泵的比例閥有ABCD四個通道,建議將鹽溶液接在下面的通道(AD),將有機溶劑接在上面的通道(C)上,也就是有機通道在鹽溶液通道的上面。且建議用水定期沖洗所有比例閥通道除去可能在閥口析出的鹽結晶。

      3.過濾白頭的維護
      濾白頭位于排氣閥內,是一種聚四氟乙烯材質的微孔過濾芯,用于過濾流動相中的微粒,是經常需要維護的地方。當系統壓力有異常增高時,首先需要檢查過濾白頭 是否阻塞了。判斷的方法是:打開排氣閥,以純水作流動相,將流速設為5mL/min,如果泵壓超過10bar,則說明過濾白頭需要更換了。對過濾白頭的預 防性維護通常可以是1~2個月更換1次,更換時同時檢查一下過濾白頭前面的密封金墊,如果發現變形,也應及時更換。 如果過濾白頭更換過于頻繁,則需要認 真檢查一下流動相的品質,確保流動相上機前過濾,確保使用了合適的過濾膜。如果流動相有長菌現象,除了配置新的溶劑,還應對相應的溶劑管線和脫氣機通道進 行徹底的清洗。

      4.柱塞桿與柱塞密封圈的維護
      柱塞密封圈套在柱塞桿上用于隔離泵與外界,工作時,它和柱塞桿進行頻 繁的往復摩擦,使用一段時間后,會有一定的磨損,因而密封圈需要定期更換以保證系統的密封性。更換活塞密封墊時檢查活塞桿上是否有劃痕。有劃痕的活塞將導 致輕度滲漏,并降低密封墊的使用壽命。應盡早更換有劃痕的活塞。

      柱塞密封圈有反相和正相之分,反相密封圈為黑色,石墨Teflon材質;正相呈橘黃色,聚乙烯材質,更適用于正相溶劑。1100/1200標配的是反相密封圈,正相應用時,需要更換為正相密封圈。

      溶液對柱塞密封圈的壽命有著很大的影響,使用有鹽溶液作為流動相的體系時,要注意鹽溶液通道的清洗,千萬不能讓鹽溶液在系統中過夜,常常一個晚上析出的鹽 粒就會造成系統堵塞,對泵產生較大的損害。為了延長密封圈和柱塞桿的壽命,在經常使用較高濃度的緩沖鹽溶液的情況下,建議安裝柱塞清洗附件。柱塞清洗的原 理在于:柱塞泵在工作時,雖然有密封圈密封,但由于毛細作用,還是會有一些流動相滲入到密封圈與柱塞桿之間。如果流動相中有緩沖鹽,當柱塞桿壁上的溶劑揮 發掉后,極細小的鹽粒留了下來。這樣的鹽粒就象砂紙一樣磨損著柱塞桿和柱塞密封圈,會大大降低柱塞桿和密封圈的壽命。柱塞清洗附件是在柱塞桿的中間加入了 一個可以有水流過的腔體,通過水不斷的流動,就可以帶走滲進來的鹽溶液,防止了鹽粒的析出,保護了柱塞桿和柱塞密封圈。通常我們往柱塞清洗的水里加入 10%的異丙醇,可以減小水的張力,便于清洗液流動,并且抑制長菌。但有一點要注意的是,裝有柱塞清洗附件的泵頭,清洗液流量可以很小(如沒分鐘幾滴), 但一定不要讓清洗通道里干涸,如果水流光了,應該盡快換上新的溶液。否則會減少柱塞桿和密封圈的壽命。

      5.主動閥的維護
        動閥是流動相進入泵體的門戶。如果我們發現流量為零,流量不穩,或泵壓波動特別大,常常都是因為主動閥漏或是堵了。主動閥里面裝有一個小的單向閥芯,我們 將其取下,在異丙醇內超聲清洗一下,一般能解決這樣的問題。如果超聲不能解決問題的話,可以更換該閥芯。對于經常使用緩沖鹽體系的用戶,手頭常備一個這樣 的閥芯是非常有用的,往往可以及時解決問題,大大的降低停機帶來的損失。

      6.出口閥的維護
      出口閥內部也有,如果有鹽粒或其它雜質滲入其中,也會造成出口閥的堵或漏,常常表現為壓力的異常波動。通常我們可以用異丙醇或60度左右的熱水沖洗系統,如果無效,在異丙醇中超聲清洗它常常會解決這樣的問題。
       
      三、保留時間重現性不好,可能的原因有哪些?

      保留時間不重現還會影響到峰面積的重現性,導致實驗無法進行。引起這種現象因素很多,建議檢查以下幾個方面:
      確認流動相是新鮮配置的,比例沒有錯誤。
      確認色譜柱是好的。
      檢查一下溶劑瓶里的溶劑過濾器沒有長菌,沒有被堵塞。
      如果使用梯度洗脫方法,請確認平衡時間足夠長。
      仔細觀察柱前壓的變化,如果壓力穩定,就可以判斷泵的系統沒有問題,請更換新的色譜柱試試。
      如果是壓力不穩定,一定會影響保留時間。

      四、柱前壓不穩定,壓力上下波動的常見原因?
       

      引起這種故障zui常見的原因是泵里有氣泡,建議用以下的方法排除。
      如果系統沒有配置脫氣機(二元泵),溶劑一定要經常超聲脫氣。
      脫氣機的效率不夠,特別是用甲醇/水的系統zui容易發生。可以將AB通道串聯;CD通道串聯用來延長脫氣的時間,效果非常明顯。

      主動閥閥芯污染 可以將閥芯取下,用甲醇超聲清洗。

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